组蛋白乳酸化研究切入点（上）——乳酸化水平检测方法及指标

      用LC/MS或LC-MS/MS检测赖氨酸肽段是否有乳酸基团的特征峰，这是经典方法，也是最早用于鉴定Kla修饰的方法。这个方法的优点是精准全面。不但能鉴定是否有Kla修饰，还能通过读谱确定修饰的具体位点。特别适合开创性高的课题。

     在此基础上，还可以用Kla修饰蛋白组学对特定体系和生理过程中的组织样本进行检测，这个方法的优点是能一次性鉴定出多个候选基因。但对样本量要求高，候选验证的工作量也很大。适合方向选定后前期数据不多的课题。

    乳酸化修饰的抗体已经很成熟，有检测全部乳酸化修饰的（pan-Kla)，也有检测特异性位点乳酸化修饰的抗体，例如anti-H3K18la, anti-H3K27la,H4K12la等。根据实验的精细程度，可以选择免疫斑点实验（左图）和WB实验（右图）。相比其它检测方法，这个方法步骤相对简单，对样本制备的要求相对低，特别适合需要考虑剂量效应和时间效应的课题。

     在免疫斑点实验的基础上，也可以用免疫组化或免疫荧光检测样本中乳酸化修饰。与免疫斑点实验和WB相比，这个办法更直观，图片更美观，还能提供乳酸化修饰在细胞器中的定位，特别适合研究对象是复杂组织或者有单细胞测序预算的课题。