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组蛋白乳酸化研究切入点（中）——乳酸自身的检测方法及指标
2024-04-09 11:46
直接检测乳酸化修饰具有周期长，成本高和样本制备繁琐的缺点，有没有更简单直观判断乳酸化修饰是否调控某一生化体系或是某一生理病理过程呢？答案是直接检测乳酸水平。乳酸化修饰具有剂量依赖效应，当细胞内乳酸水平升高，组蛋白乳酸化修饰也会增加，因此除了直接检测组蛋白乳酸化信号，还可以检测细胞内、组织内和体液中的乳酸水平。
乳酸检测主要有酶显色法和酶电极法两类。酶电极法可用于乳酸水平的动态检测，对乳酸化修饰检测来说，不需要这么强的即时性，本文暂不讨论。
这个方法使用的仪器是分光光度计或者酶标仪，结果示例如下图所示。检测的样本类型有：细胞上清，细胞裂解物，组织裂解物，尿液、血清、血浆等生物组织液。
乳酸在210nm波长下有明显的吸收峰，液相分离后用紫外检测，快速简单。结果如下图所示。这个方法使用的仪器是色谱仪，检测的样本类型有：细胞上清，细胞裂解物，组织裂解物，尿液、血清、血浆等生物组织液。
这个方法使用时，需要注意的是植物体系中许多小分子有机酸会对乳酸检测造成干扰，使乳酸在色谱检测时出峰不稳定且混有杂峰，无法很好地判断乳酸的出峰。需要改变流动相，改变流速等进行条件优化。
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